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免疫共沉淀二

优点: 1.于天然状态下相互作用的蛋白质。 2.蛋白的相互作用是在自然状态下进行的,可以避免人为的影响。 3.分离得到相互作用蛋白的天然符合物。 缺点: 1. 低亲和力和瞬间的蛋白

小鼠体内生物分布实验五

4. 小鼠的解剖实验: (1) 先解剖已处死小鼠的头部,取出完整的脑部; (2) 用镊子夹住小鼠肚皮上的皮毛,用剪刀剪去皮毛下的腹膜,此时可以看到小鼠腹部的脏器,依次完整的取出肝、

分子提取方法(八)

DNA 提取 (一)培养细胞 DNA 提取 1、 原理 细胞裂解液中含有去污剂十二烷基硫酸钠( SDS ),溶解细胞膜、核膜,破坏细胞并释放出来 DNA 。蛋白酶 K 是光谱蛋白酶,能在 SDS 和 EDTA 存

蛋白质检测(九)

蛋白印迹法 六 显色 酶和底物反应显色是蛋白印迹法的最后一步,一般常用酶有 HRP 和 AP ,根据成像底物可分为显色底物和发光底物。发光底物可选用 HRP 标记二抗,显色底物可选用

HE染色在临床病理诊断中的应用(二)

HE 染色 对手术室切除的全部或部分器官或大块组织切除标本 ; 各种纤维内窥镜取材的小块组织标本 : 各种穿刺取材的穿刺小标本 , 各种细胞学标本 , 一些特殊检查的体液或血液标本 ,

单细胞电泳技术(三)

10 电泳:将载片移入电泳槽,调节电泳槽两端电压为 20V , 200mA , 4 摄氏度,电泳 20min 。 11 中和:将载玻片移入新的裂解槽,注入中和液,浸没玻片, 4 摄氏度中和三次,每次 5min.

免疫共沉淀一

一、原理: 免疫共沉淀( Co-IP )是以研究蛋白质相互作用的经典方法,其原理基础为抗体 - 抗原之间的专一性作用。在分子病理生物学研究领域, Co-IP 是用以确定两种蛋白在完整细胞

质粒的制备、提取三

一、 操作前准备 1. 仪器设备 PCR 仪、 37℃ 恒温培养箱、 37℃ 恒温摇床、水浴锅、超净工作台、高速离心机等等。 2. 试剂 过表达载体质粒( pGL3-Basic 等)、限制性内切酶、胶回收试剂

分子提取方法(七)

RNA 提取(一) 1) 取出 -80 ℃保存样品,室温,溶解。 2) 每 1ml Trizol 加 0.2ml 氯仿,强烈上下混匀,室温。静置 2-3min ,抽提 RNA 。 3) 用超速低温离心机 4 ℃, 15000rpm, 离心 15min 。

蛋白质检测(八)

蛋白印迹法 5 实验步骤 (1) 封闭结束后,用 PBS-T 液轻轻清洗膜,去除封闭液。 (2) 用一抗室温孵育 1h 或 4 ℃过夜。 (3) PBS-T 液清洗, 10min ×3 次。 (4) 二抗孵育,室温, 1h 。

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