质粒的制备、提取八
三、 质粒提取 （二） 收获细菌并裂解 1. 离心扩增好的菌液，按说明书将菌液重悬，转入 1.5ml 离心管中。 2. 用质粒小量抽提试剂盒，按说明书要求提取质粒。 3. 细菌高速离心 1min, 彻
流式细胞术检测细胞周期
1 实验原理 用流式细胞仪检测细胞周期，通常用碘化丙啶（ propidium iodide ， PI ）染细胞核。 PI 在一定波长的光下发出荧光，其强度与 DNA 含量成正比。通过流式细胞仪分析各时期的细胞
免疫共沉淀五
15. 14000rpm 瞬时离心 5s ，去上清，收集琼脂糖珠 - 抗原抗体的复合物。 16. 用 800ul 预冷 RIPA buffer 冲洗 3 遍。 17. 用 60ul 2 倍上样缓冲液将琼脂糖珠 - 抗原抗体复合物悬起，轻轻敲打混匀。
质粒的制备、提取七
三、 质粒提取 （一） 摇菌培养 1. 将鉴定测序正确的克隆菌液涂在 LB 固体平板。 2. 置于 37 ℃恒温培养箱，培养 12-17h ，待长出菌落。 3. 灭菌 15ml 离心管内加入 5ml 含抗生素的 LB 液体培
分子提取方法（十一）
DNA提取 （一）培养细胞DNA提取 3、破碎细胞、释放核酸（二） （10）上清液移至一个新的1.5ml离心管中。 （11）重复（7）~（10）2~3次，直至离心后液面间没有蛋白。 （12）加入250ul氯仿
蛋白质检测(十二）
七、蛋白印迹实验常见问题及原因分析 1. 没有带？ 原因：样品中抗原含量不足（抗原表达量过低；蛋白降解；上样量不足；样品制备错误）；制胶浓度比例不合适；转膜不完全；一抗
HE染色在临床病理诊断中的应用（五）
HE 染色 组织细胞取材、固定、脱水、切片的质量对 HE 染色影响很大 , 组织染色的质量直接影响到临床诊断 , 同时也影响临床治疗。所以对各种不同的标本取材要求不一样 , 包括取材的
荧光素酶及其报告基因的应用和检测（六）
中荧光素酶的发光，曝光 10min ， binning3x3 四 荧光素酶报告基因的检测方法 依赖生物发光特性 , 利用闪烁计数器 ( scintillationcounter) 对荧光素酶的活性作出定量检测。在标准反应条件下
分子提取方法（十）
DNA提取 （一）培养细胞DNA提取 2、试剂 PBS缓冲液、细胞裂解液、蛋白酶K溶液、tris饱和酚、氯仿、TE缓冲液、RNaseA 、3M醋酸钠（PH 7.4）、乙醇等。 3、破碎细胞、释放核酸（一） （1）取
蛋白质检测（十一）
蛋白印迹法 六 显色 3. 碱性磷酸酶缓冲液： 100ml 配方如下。 1mol/L Tris-HCL(pH 9.5) 10ml 5mol/L NaCl 2ml 1mol/L MgCl2 0.5ml DDW 87.5ml * 冷藏保存，可保存数月。 4. 显色液 100BCIP 0.1ml 100×NBT 0.1ml * 显色后
