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细胞中mRNA原位杂交技术三

实验步骤: 二.杂交与显色 1 、将加入探针的杂交液先于 50 ℃预热,均匀涂于切片表面,加上硅化盖玻片,放于湿盒中, 50 ℃孵育 12-16h 。 2 、 1 ×SSC (含 50% 甲酰胺), 50 ℃洗涤

蛋白质检测(七)

蛋白印迹法 五 抗原 - 抗体反应 4 二抗的处理 (1) 常用二抗: HRP 偶联二抗。也可用碱性磷酸酶标记二抗,但不够灵敏。 (2) 二抗稀释液: PBS/PBS-T 液、 TBS/TBS-T 液、一般的封闭液等

细胞中mRNA原位杂交技术(四)

附表 1 :部分试剂配制 1 0.1mol/L 三乙醇胺 -0.25% 乙酸酐:三乙醇胺 13.2ml ,氯化钠 5g ,浓盐酸 4ml , DEPC 水定容至约 1000ml ,临用前,一边摇动溶液一边加入乙酸酐 2.5ml ,充分混合。 2

荧光素酶及其报告基因的应用和检测(一)

一 生物发光 生物发光( bioluminescence ) 是指生物体发光或生物体提取物在实验室中发光的现象。它不依赖于有机体对光的吸收,而是一种特殊类型的化学发光, 化学能转变为光能的效

细胞划痕(迁移)实验一

实验步骤: 1 、先用 marker 笔在 6 孔板背后,用直尺比着,均匀得划横线,大约 每隔 1cm 一道,横穿过孔。每孔至少穿过 5 条线。 2 、在空中加入约 5 × 105 个细胞,具体数量因细胞不同

免疫共沉淀四

具体步骤: 8. 4 ℃, 14000g 离心 15min ,将上清转移到一个新的离心管中。 9. 测定蛋白浓度,可选用 Bradford 法做蛋白标准曲线。 10. 蛋白定量,分装, -20 ℃保存,可保存 1 个月。 11. 用

小鼠体内生物分布实验六

三、 实验仪器与试剂 主要仪器:放射性活度计 , FW-2000 锝分析仪,天平, 1 ml 一次性注射器,解剖 工具,毛细管,聚酰胺薄片,烧杯等。 主要试剂: Na99mTcO4 淋洗液,生理盐水,乙腈

基因芯片技术五

(3) 采用了 CCD 相机的荧光显微镜 这种探测装置与以上的扫描方法都是基于荧光显微镜,但是以 CCD 相机作为信号接收器而不是光电倍增管,因而无须扫描传动平台。由于不是逐点激发

微卫星不稳定性的检测四

举例: 大肠癌微卫星不稳定性 1. 标本收集和基因组 DNA 提取:自浙江医科大学第二附属医院肿瘤科 1996 年 3 月~ 1997 年 5 月间经病理证实的大肠癌患者 60 例,男 37 例,女 23 例。年龄

分子提取方法(十四)

DNA 提取 (二) 从各种组织中提取 DNA 4. DNA 保存 (最好溶于 TE 缓冲液( PH 8.0 ), 4 ℃保存数日, -20 ℃保存数月至数年, -70 ℃保存 5 年以上。 EDTA 螯合二价离子,抑制 DNA 酶活性,减

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