脂肪干细胞培养
吸脂术时用无菌针管从臀上方吸取深层脂肪组织20 mL. 在1 h内将其移至离心管内,加入等量PBS缓冲液,充分振荡后低速离心800 r/min×10 min. 反复冲洗3次后加入等量15 g/L I型胶原酶. 37℃水浴中充分振
蛋白质免疫印迹(Western Blot,WB )
Western免疫印迹(Western Blot)是将蛋白质转移到膜上,然后利用抗体进行检测的方法。对已知表达蛋白,可用相应抗体作为一抗进行检测,对新基因的表达产物,可通过融合部分的抗体检测。
从动物肝脏中提取DNA
在浓氯化钠(1―2mol/L)溶液中,脱氧核糖核蛋白的溶解度很大,核糖核蛋白的溶解度很小,在稀氯化钠(0.14 mol/L)溶液中,脱氧核糖核蛋白的溶解度很小,核糖核蛋白的溶解度很大。因此,可
糖原染色法(PAS染色)
过碘酸是一种氧化剂,能使细胞内的多糖乙二醇基氧化成二醛,再与Schiff液的无色品红结合生成一种品红化合物,形成红色,定位于胞质上。 PAS染色主要用于增生组织细胞的染色。组织细胞可
蛋白质检测
蛋白印迹法 五 抗原 - 抗体反应 4 二抗的处理 (1) 常用二抗: HRP 偶联二抗。也可用碱性磷酸酶标记二抗,但不够灵敏。 (2) 二抗稀释液: PBS/PBS-T 液、 TBS/TBS-T 液、一般的封闭液等
静脉注射和口服等量生理盐水对小白鼠尿量的影响
通过对小白鼠注射和口服等量生理盐水,了解尿液生 成过程,进一步熟悉掌握肾小管的功能。 方法与步骤 1、小白鼠抓取、称重、麻醉:抓取3只体型相近、健康指数大致 一致的小
细菌16S、23S分子鉴定
通过PCR扩增分枝杆菌染色体上一段DNA,将扩增产物经限制性内切酶消化,将消化的样品进行琼脂糖凝胶电泳分析,不同分枝杆菌酶切片段的数量或大小不同,电泳图谱呈现多态性。如对16-23srD
ChIP染色质免疫沉淀技术
交联反应的逆转和DNA的纯化: 用不含DNase的RNase和Proteinase K,65oC保温6小时逆转交联,经DNA纯化柱回收DNA或用酚氯仿抽提、乙醇沉淀纯化DNA。DNA纯化柱纯化DNA的质量高,有利于下一步PCR等方法
双荧光素酶报告基因检测 (miRNA靶基因验证)实验四
1. 质粒转染细胞;2.双报告基因检测;3. 统计学分析
质粒的制备
四、 培养基配方 1. LB 液体培养基 100ml 配方如下: 胰蛋白胨 1g 酵母提取物 0.5g NaCl 1g DDW 定容 100ml 2. LB 固体培养基 100ml 配方如下: 胰蛋白胨 1g 酵母提取物 0.5g NaCl 1g 琼脂粉 1.5g DDW 定容