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细胞实验室标准化操作

一、细胞操作 2.细胞冻存 研究意义: 细胞冻存是细胞保存的主要方法之一。利用冻存技术将细胞置于-196℃液氮中低温保存,可以使细胞暂时脱离生长状态而将其细胞特性保存起来,这样

HE染色在临床病理诊断中的应用

HE 染色 HE 染色时根据不同组织选不同染色、脱水、脱腊时间。 HE 染色操作程序如下 :1) 二甲苯去蜡 ( 经 2 次 )5 ~ 10 min 。 2) 无水乙醇、 95% 乙醇、 80% 乙醇、 70% 乙醇各 1 ~ 2 min, 然后蒸

启动子质粒(十三)

三、 质粒提取 (三) 质粒的纯化 附录: 1 OD260 和 OD280 的比值表示质粒的纯度。比值大于 1.8 ,说明纯化产物的纯度达到了 90% 。纯化好的质粒可用于转染实验,一般纯化步骤在细胞间

启动子质粒(十二)

三、 质粒提取 (三) 质粒的纯化 1. 将之前提取好的质粒放入 1.5ml 离心管中,加入 1/10 体积的 3mol/L 无菌乙酸钠溶液。 2. 加入 2 倍体积的无水乙醇,放置于 -20 ℃沉淀 4-6h 或过夜。 3

ChIP染色质免疫沉淀技术(八)

ChIP技术的应用 染色质免疫沉淀技术还可用于分析两种蛋白共同结合的 DNA 序列,即 ChIP reChIP 方法。 ChIP reChIP 是在第一次 ChIP 的基础上不解交联,而继续进行另一个目的蛋白的免疫沉淀

启动子质粒(十)

(二) 收获细菌并裂解 1. 离心扩增好的菌液,按说明书将菌液重悬,转入 1.5ml 离心管中。 2. 用质粒小量抽提试剂盒,按说明书要求提取质粒。 3. 细菌高速离心 1min, 彻底去除上清。

启动子质粒(十一)

三、 质粒提取 8、 将吸附柱放入收集管内,离心得到的上清转移至吸附柱,室温, 15000rpm ,高速离心 30s 。 9、 弃废液,将吸附柱放入收集管,加入 700ul WB 溶液到吸附柱中, 15000rpm ,

启动子质粒(九)

三、 质粒提取 (一) 摇菌培养 1. 将鉴定测序正确的克隆菌液涂在 LB 固体平板。 2. 置于 37 ℃恒温培养箱,培养 12-17h ,待长出菌落。 3. 灭菌 15ml 离心管内加入 5ml 含抗生素的 LB 液体培

ChIP染色质免疫沉淀技术(七)

ChIP 技术的应用 目前,随着人类基因组测序工作的基本完成,研究目的蛋白和整个基因组的相互作用逐渐成为研究的热点。由于基因组中的信息量非常大,上述常规方法通常无法满足科

动物组织培养准备技术之清洗与灭菌(2)

(四)消毒与灭菌 1.物理消毒法 1)射线消毒 主要是使用 60 Co 、 X 射线进行灭菌消毒,可用于牛血清和塑料制品的灭菌。 2)紫外线消毒 用于空气消毒,操作台面和一些不能用干热,湿

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