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启动子质粒(七)

质粒的制备、提取 启动子质粒 四、 培养基配方 1. LB 液体培养基 100ml 配方如下: 胰蛋白胨 1g 酵母提取物 0.5g NaCl 1g DDW 定容 100ml 2. LB 固体培养基 100ml 配方如下: 胰蛋白胨 1g 酵母提取

免疫共沉淀(二)

蛋白质检测 免疫共沉淀 优点: 1.于天然状态下相互作用的蛋白质。 2.蛋白的相互作用是在自然状态下进行的,可以避免人为的影响。 3.分离得到相互作用蛋白的天然符合物。 缺点:

叶绿体的分离与荧光观察

叶绿体的分离与荧光观察 实验方法原理 组织匀浆后悬浮在等渗介质中进行差速离心,是分离细胞器的常用方法。一个颗粒在离心场中的沉降速率取决于颗粒的大小、形状、密度、离心

单细胞电泳技术(三)

10 电泳:将载片移入电泳槽,调节电泳槽两端电压为 20V , 200mA , 4 摄氏度,电泳 20min 。 11 中和:将载玻片移入新的裂解槽,注入中和液,浸没玻片, 4 摄氏度中和三次,每次 5min.

动物生理学实验设计

神经纤维的双向传导实验 1 ,实验的内容 验证神经纤维的双向传导 2 ,实验的原理 神经细胞膜内外的离子浓度不同,我们称之为膜电位。当神经细胞处于静息状态时,膜电位分布为外

HE染色在临床病理诊断中的应用

HE 染色 染色各步骤所需的时间 , 常受温度、切片厚度等影响 , 可根据镜下观察所见酌情予以调整。各种染料试剂一般选用化学纯。各种染料着色效果常因生产厂和批号不同而异 , 启用任

启动子质粒(六)

三、 质粒提取 (三) 质粒的纯化 附录: 1 OD260 和 OD280 的比值表示质粒的纯度。比值大于 1.8 ,说明纯化产物的纯度达到了 90% 。纯化好的质粒可用于转染实验,一般纯化步骤在细胞间

免疫共沉淀(一)

一、原理: 免疫共沉淀 ( Co-IP )是以研究蛋白质相互作用的经典方法,其原理基础为抗体 - 抗原之间的专一性作用。在分子病理生物学研究领域, Co-IP 是用以确定两种蛋白在完整细胞

启动子质粒(五)

三、 质粒提取 (二) 收获细菌并裂解 1. 离心扩增好的菌液,按说明书将菌液重悬,转入 1.5ml 离心管中。 2. 用质粒小量抽提试剂盒,按说明书要求提取质粒。 3. 细菌高速离心 1min, 彻

体外SUMO修饰实验(五)

5. SUMO化蛋白的检测 (1 )培养细胞,待细胞融合至 90% 左右。 ( 2 ) PBS 洗涤细胞 2 次, 0.25% 胰酶消化细胞。 ( 3 ) 1000rpm ,离心 3-5min 收集细胞。 (4) PBS 洗涤细胞 2 次。 (5) 1

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