双萤光素酶报告基因检测 (miRNA靶基因验证)实验
萤光素酶是理想的报告基因,因为哺乳动物细胞中不含内源性萤光素酶,一旦转录完成立刻就生成功能性的萤光素酶。单报告基因实验往往会受到各种实验条件的影响,而双报告基因则
CRISPR 大危机?小鼠体内被引发数百种“意外突变”
众所周知,CRISPR-Cas9 基因编辑技术凭借其简易、高效和多样化的特点,目前被越来越多的人认为是癌症的“控制中心”,可以用来修复导致失明的基因突变、治疗生物的遗传疾病、甚至
蛋白质二维电泳技术原理简介
二维聚丙烯酰胺 凝胶电泳 技术结合了等电聚焦技术(根据蛋白质等电点进行分离)以及SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳技术(根据蛋白质的大小进行分离)。这两项技术结合形成的二维电泳
无表面活性剂的膜蛋白提取方法
膜蛋白具有许多重要的细胞功能,对生物体存在至关重要。他们具有超过 60% 的药物靶点,占细胞总蛋白的 20%-30%。膜蛋白包括完整的膜蛋白,跨膜蛋白和外周膜蛋白。膜蛋白或者附着在
蛋白质Western Blot 低成本快速半干转印方法
随着半干转印系统不断进步,有越来越多的方法被应用于加速转印过程。例如,用户可以通过更换转印缓冲液、使用不同的转印装置,或调整转印条件、修改实验设计,从而缩短实验时
膜蛋白转运研究
蛋白转运过程可以形象的描述为成千上万的蛋白质在一个细胞内按照有序的方式移动,就像街道和高速公路上的车辆,每一个细胞中的蛋白质被合成后都有它自己的目的地。质膜蛋白(
蛋白质检测一
抗原 - 抗体反应 二抗的处理 (1) 常用二抗: HRP 偶联二抗。也可用碱性磷酸酶标记二抗,但不够灵敏。 (2) 二抗稀释液: PBS/PBS-T 液、 TBS/TBS-T 液、一般的封闭液等。 (3) 二抗稀释
蛋白质检测二
蛋白印迹法 电泳 电泳条件:电压 200V ,电流 8mA ,染料进入分离胶时电流增加到 16mA ,时间一般 2-3 小时。 * 溴酚蓝刚跑出胶即可终止电泳进行转膜,也可以根据时间经验停止电泳。
ChIP染色质免疫沉淀技术
1. 细胞固定 甲醛能有效的使蛋白质 - 蛋白质,蛋白质 -DNA ,蛋白质 -RNA 交联,形成生物复合体,防止细胞内组分的重新分布。甲醛的交联反应是完全可逆的,便于在后续步骤中对 DNA 和
小鼠核酸免疫实验
采用小鼠基因枪接种DNA的方法 先将压缩氦气同调节阀和基因枪连接,根据操作手册来使用基因枪。在来麻醉小老鼠( 麻醉是可选的),把它腹部的毛剃掉。再将空弹盒装枪,开启氦气罐