体外SUMO修饰实验二

1、感受态细胞的制备（1）准备 LB 培养基： 0.5% 酵母浸提物、 1% 胰蛋白胨、 1%NaCl(PH 7.0), 高压灭菌， 4 ℃保存备用。（2）准备 LB 琼脂平板：取新鲜配置的 100-200ml 的 LB 培养基，加入

ChIP染色质免疫沉淀技术

2. 染色质断裂交联后的染色质可被超声波或 Micrococcal Nuclease 切成 400~600 bp 的片段 ( 用琼脂糖凝胶电泳检测 ) ，以便暴露目标蛋白，利于抗体识别。超声波是使用机械力断裂染色质，容

铜若丹明法比红氨酸法更敏感，然而，若丹明法被证实是蛋白与铜相结合而不是与铜本身结合。因此，尽管我们认为此法具有更高的敏感性，但是有可能因其特异性低于若丹明法从而得

六、实验结果及分析（3）根据实验所得曲线，小肠的收缩活动并不是随着乙酰胆碱浓度的加大而增强，可能是因为随着实验的进行与时间的延长，小肠平滑肌的收缩力下降，对乙酰胆

在正常人体细胞内，微卫星的分子结构保持稳定不变，其原因是在人体细胞内有一种能够修复微卫星的安全保障体系，这种安全保障体系是由一系列特异性修复微卫星碱基错配的酶分子

小泛素相关修饰（ SUMO ）是生物内极为重要的一种蛋白翻译后修饰方式，是一类广泛存在于真核生物中且高度保守的蛋白质家族，它在调节蛋白质间相互作用、定位、转运、转录、细胞

四荧光素酶报告基因的检测方法依赖生物发光特性 , 利用闪烁计数器 ( scintillationcounter) 对荧光素酶的活性作出定量检测。在标准反应条件下 , 加入超量底物 , 经一定时间内 , 荧光闪烁

1. 细胞固定甲醛能有效的使蛋白质 - 蛋白质，蛋白质 -DNA ，蛋白质 -RNA 交联，形成生物复合体，防止细胞内组分的重新分布。甲醛的交联反应是完全可逆的，便于在后续步骤中对 DNA 和

天狼星红是一种很强的酸性染料，每个分子内有 6 个磺酸基，它可以和胶原分子碱性氨基酸反应，有较强的双折光现象，较好的提高Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ型胶原的分辨率。Ⅰ型胶原染色后呈

3 荧光素酶作为报告基因的优势： ² 内源性低，哺乳动物无内源性表达 ² 荧光素酶检测不受细胞内其他物质影响 ² 发光检测，检测方便 ² 灵敏度高， 10 ‐ 20 摩尔荧光素酶分子 ² 检测