微卫星不稳定性的检测

1981 年 Miesfeld 从人类基因文库中发现一段长约 2-10 个核苷酸片段，他将这一小段核苷酸片段命名为“微卫星” (microsatellite,MS) 。人体在正常状态下，微卫星的长度和排序保持不变，并且

蛋白质检测

蛋白印迹法五抗原 - 抗体反应 1 仪器和设备塑料盒、振荡器。 2 封闭一般采用 5% 脱脂奶粉进行封闭，室温， 30-60min 。 * 封闭液的浓度可以是（ 1%-5% ），根据自己的条件摸索浓度就可

巢式PCR是一种变异的聚合酶链反应（PCR），使用两对（而非一对）PCR引物扩增完整的片段。第一对PCR引物扩增片段和普通PCR相似。第二对引物称为巢式引物（因为他们在第一次PCR扩增片

背景及原理：细胞中存在着能分解磷酸酯的酶，其中最主要的是磷酸酯酶。这类酶按最适 PH 可分为两类： 1.PH 在 9.5 左右的条件下发挥作用，称为碱性磷酸酶；另一类在 PH5.0 左右的条

背景（ 2 ）：克隆的目的基因只有通过表达才能探索和研究基因的功能及基因表达调控的机制，明了其利用价值和途径。质粒包括基因过表达质粒、干扰质粒和启动子质粒等等多种类型

2 组织样品处理（1）实验动物组织用手术刀切下 1g 左右，放在冰生理盐水或 PBS 液中洗去血液，滤纸吸去组织表面的水分。（2）小剪刀剪碎组织，加入 1.0-1.5ml Trizol ，组织研磨器或

蛋白印迹法四转膜操作步骤： 1 准备：切好的 PVDF 膜和滤纸置于甲醇 5min ， PVDF 膜置于电转缓冲液浸泡 10min 以上。 * 转一张膜需 6 张 6cm ×9cm 滤纸和 1 张 6cm×9cmPVDF 膜，滤纸和膜的尺寸

流式细胞术检测细胞周期 1 实验原理用流式细胞仪检测细胞周期，通常用碘化丙啶（ propidium iodide ， PI ）染细胞核。 PI 在一定波长的光下发出荧光，其强度与 DNA 含量成正比。通过流

附表 1 ：部分试剂配制 1 0.1mol/L 三乙醇胺 -0.25% 乙酸酐：三乙醇胺 13.2ml ，氯化钠 5g ，浓盐酸 4ml ， DEPC 水定容至约 1000ml ，临用前，一边摇动溶液一边加入乙酸酐 2.5ml ，充分混合。 2