镀银染色
根据Fontana的螺旋体改良镀银染色法,于1958年Rhodes建立的一种细菌鞭毛镀银染色法。试剂分为媒染剂和银染剂。Rhodes镀银染色法有染色液成分复杂、操作繁琐的缺点。1965年,Blenden等改良了细菌
杂交和显色
1、将加入探针的杂交液先于50℃预热,均匀涂于切片表面,加上硅化盖玻片,放于湿盒中,50℃孵育12-16h。 2、1×SSC(含50%甲酰胺),50℃洗涤2次,每次10min。 3、2×SSC(含50%甲酰胺),
显色
酶和底物反应显色是蛋白印迹法的最后一步,一般常用酶有HRP和AP,根据成像底物可分为显色底物和发光底物。发光底物可选用HRP标记二抗,显色底物可选用HRP标记二抗或AP标记二抗。显色分为
免疫铁蛋白电镜技术
1.基本原理 铁蛋白的分子量460kD,为一种含铁(约占23%)的蛋白质。直径10―12nm。目前常用的间接免疫染色技术是应用低分子量的双功能试剂将第二抗体与铁蛋白相连,制备标记抗体。此
细胞中酸性磷酸酶的定位
细胞中存在着能分解磷酸酯的酶,其中最主要的是磷酸酯酶。这类酶按最适PH可分为两类:1.PH在9.5左右的条件下发挥作用,称为碱性磷酸酶;另一类在PH5.0左右的条件下发挥作用,称为酸性磷酸
D-Hanks液的配制
Hanks和D-Hanks液的成分比较。 依次加入药品至800mL蒸馏水中,溶解后定容至1000mL。分装成100mL/瓶,其中1瓶加入终浓度0.02%和DETA,准备配制胰蛋白酶。 高压灭菌,10MPa,10min。
实验动物的采血方法
1.小白鼠和大白鼠的采血方法 (1) 剪(割)尾采血 用于需血量很少的情况。固定动物并露出鼠尾, 将鼠尾置45℃温水中浸泡数分钟(或用二甲苯棉球涂擦),使尾部血管扩张,用棉求
间接免疫荧光法的注意事项
• 荧光染色后一般在1h内完成观察,或于4℃保存4h,时间过长 ,会使荧光减弱。 • 每次试验时 ,需设置以下三种对照: – 阳性对照:阳性血清+荧光标记物 – 阴性对照:阴性血清+荧光
PH探针染色这4点要注意!
BCECF AM是最常用的检测细胞内pH的荧光探针。BCECF AM即2',7'-bis-(2-carboxyethyl)-5-(and-6)-carboxyfluorescein,acetoxymethyl ester,本BCECF AM (pH荧光探针)是配制于无水DMSO (anhydrous DMSO)中的储存液,浓度为5mM。 BCE
制备抗肽抗体实验
制备抗肽抗体实验 先将10mgBSA溶于0.5ml0.1mol/lpH6.8的磷酸钠缓冲液当中,放在一个2ml的玻璃试管中,加50μlMBS/DMF溶液,并在室温下温和搅拌30min的时间。加样到PD-10柱子上,上柱前用10ml的0.1mo