显色

显色

酶和底物反应显色是蛋白印迹法的最后一步，一般常用酶有HRP和AP，根据成像底物可分为显色底物和发光底物。发光底物可选用HRP标记二抗，显色底物可选用HRP标记二抗或AP标记二抗。显色分为酶促底物发光和化学发光或荧光法。

       1.HRP标记二抗

     （1）酶促底物发光法

       DAB显色液配制：50ml配方如下。

       DAB

       1mol/L Tri-HCL(pH 7.4)

       DDW

       *现配现用，避光保存。

       *显色前每50ml加入30%过氧化氢7.5ul。

       *敏感性较ECL差。DAB是致癌物质，配制时应戴手套。显色后膜可用DDW清洗，风干保存。

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