蛋白印迹法
2016-05-25来源:未知
样品处理及上样
1、取15-20ug蛋白,加2倍SDS上样缓冲液7ul,DDW定容至总体积14ul。
* 上样总体积一般少于15ul,加样孔的最大限度可加20ul样品。
2、95℃孵育5min,使蛋白变性。
3、电泳槽内加入足够的电泳液。
4、上样,分子Marker也要一起上样,用微量进样器贴壁吸取样品,加样器枪头插到加样孔中缓慢加入样品。
*样品吸出时不要吸进气泡。加样太快可使样品冲出加样孔,若有气泡也可能使样品溢出,加下一个样品时,进样器枪头需在外槽电泳缓冲液中洗涤3次,一面交叉污染,有条件最好加样时一个样品换一个枪头。
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