动物体内实验四
小鼠体内生物分布实验 二、实验原理 3. 小鼠的处死 : (1) 脊椎脱臼法 右手抓住小鼠用力向后拉,同时左手拇指与食指用力向下按住鼠头,将脊髓与脑髓拉断,鼠便立即死亡;如左手拇
Trizol提取总RNA
1 细胞样品处理 (1)6孔细胞培养板或35mm培养皿培养的细胞待70%-80%融合。 *悬浮细胞时,离心上清液收集细胞。 (2)彻底弃上清液,每孔加0.5-1ml Trizol,混匀,室温放置5min使细胞充分裂
HE染色技术几种常见的染色问题一
1.脱蜡方面: 切片中白色的区域脱蜡不彻底,染色液由于石蜡斑点的残留而不能渗透着色。 原因:①烤( 烘) 片温度太低,脱蜡前没有充分烤( 烘) 干。 ②二甲苯脱蜡时间不足, 或二甲
细胞中mRNA原位杂交技术五
附2:探针的选择与标记 1.探针选择 特异性的探针必须是一段已知的基因片段。相对于膜上杂交而言,原位杂交有特殊性。即细胞和组织中的待测基因隐藏于类似于网络状的立体结构之
蛋白质检测四
蛋白印迹法 三 电泳 * 考马斯亮蓝法:用 40% 双蒸水 /10% 醋酸 /50% 甲醇的溶液固定胶中蛋白,考马斯亮蓝 R-250 染色室温染色 4h 过夜,保持摇匀转入 67.5% 双蒸水 /7.5% 醋酸 /25% 甲醇摇匀脱
质粒的制备、提取二
背景( 2 ): 克隆的目的基因只有通过表达才能探索和研究基因的功能及基因表达调控的机制,明了其利用价值和途径。 质粒 包括基因过表达质粒、干扰 质粒 和启动子质粒等等多种
动物体内实验三
小鼠体内生物分布实验 二、实验原理 2. 小鼠 尾静脉注射 练习: 静脉注射时,用小鼠尾静脉注射架固定,先根据动物大小选择好合适的固定架,并打开鼠筒盖,手提鼠尾巴,让动物头
质粒的制备、提取一
背景( 1 ): 质粒是一种双链共价闭合的环状 DNA ,是染色体以外的稳定遗传因子。已经在细菌、真菌以及部分动植物细胞中发现质粒,以细菌中存在质粒最为普遍。质粒的制备与提取
培养原代细胞实验的一些方法
细胞原代培养可以:(1)为研究生物体细胞的生长、代谢、繁殖提供有力的手段;(2)为传代培养创造条件;(3)服务于临床实践,用于药物筛选等。 实验方法原理 将动物机体的各
RNA提取前须知
1、操作中戴口罩和手套 2、 清洁无尘环境中操作,试验台、移液器要用 75% 乙醇擦拭消毒,也可使用 RNase 抑制剂,操作时避免大声喧哗和频繁走动。 3、 玻璃器皿常规洗涤后,应用 0