ChIP染色质免疫沉淀技术四

染色质免疫沉淀中的对照与抗体选择交联反应的逆转和 DNA 的纯化：用不含 DNase 的 RNase 和 Proteinase K ， 65oC 保温 6 小时逆转交联，经 DNA 纯化柱回收 DNA 或用酚氯仿抽提、乙醇沉淀纯化

细胞中mRNA原位杂交技术四

附表 1 ：部分试剂配制 1 0.1mol/L 三乙醇胺 -0.25% 乙酸酐：三乙醇胺 13.2ml ，氯化钠 5g ，浓盐酸 4ml ， DEPC 水定容至约 1000ml ，临用前，一边摇动溶液一边加入乙酸酐 2.5ml ，充分混合。 2

ChIP 技术的应用染色质免疫沉淀的 DNA 适用于多种分析方法。如果目的蛋白的靶序列是已知的或需要验证的，可采用狭缝杂交 (Slot blot) 的方法，把靶序列特异性探针与染色质免疫沉淀的

注意事项： 1 原位杂交固定的目的是为了保持细胞结构，最大限度地保存细胞内 DNA 或 RNA 的水平，使探针易于进入细胞或组织。 DNA 较稳定， RNA 易被酶解，在 RNA 定位上，若要使 RNA 的

【注意事项】（ 1 ）干热灭菌时，应在白天使用干烤箱，并不断观察，避免发生意外。当温度超过 100℃ 时，不能再打于烤箱门。器皿烤完后，待温度降至 100℃ 之下才能开烤箱门取出

蛋白印迹法三电泳电泳条件：电压 200V ，电流 8mA ，染料进入分离胶时电流增加到 16mA ，时间一般 2-3 小时。 * 溴酚蓝刚跑出胶即可终止电泳进行转膜，也可以根据时间经验停止电泳。

小鼠体内生物分布实验二、实验原理 1. 小鼠的抓取固定方法：小鼠温顺，一般不会咬人，抓取时先用右手抓取鼠尾提起，置于鼠笼或实验台向后拉，在其向前爬行时，用左手拇指和食

小鼠体内生物分布实验一、实验目的 1. 学习小鼠的抓取固定方法、尾静脉注射、小鼠的处死及小鼠的间剖实验等基本技能。 2. 学会动物分布实验的数据处理。二、实验原理小鼠的品

分子生物学研究中要了解目的基因的存在和表达，可通过提取组织或细胞中的总 RNA 检测该基因的信使 RNA 。总 RNA 的构成是比较复杂，包括核内 RNA 和胞质 RNA ，此外 RNase 是一类活性非

背景二：苏木素 - 伊红染色法是石蜡切片的常规染色方法，能够较好地显示组织结构和细胞形态，用于观察、描述正常和病变组织的形态学，并可保存较长时间。碱性苏木素染料容易与