ChIP染色质免疫沉淀技术二

ChIP 技术的应用目前，随着人类基因组测序工作的基本完成，研究目的蛋白和整个基因组的相互作用逐渐成为研究的热点。由于基因组中的信息量非常大，上述常规方法通常无法满足科

细胞中mRNA原位杂交技术二

实验步骤：二．杂交与显色 1 、将加入探针的杂交液先于 50 ℃预热，均匀涂于切片表面，加上硅化盖玻片，放于湿盒中， 50 ℃孵育 12-16h 。 2 、 1 ×SSC （含 50% 甲酰胺）， 50 ℃洗涤

实验原理及技术背景 1 ：原位杂交组化（ ISHH ）属于分子杂交的一种，是一种应用标记探针与组织细胞中的待测核酸杂交，再应用标记物的检测系统，在核酸原有的位置将其显示出来的

（四）消毒与灭菌 1.物理消毒法 1）射线消毒主要是使用 60 Co 、 X 射线进行灭菌消毒，可用于牛血清和塑料制品的灭菌。 2）紫外线消毒用于空气消毒，操作台面和一些不能用干热，湿

蛋白印迹法二样品处理及上样 1、取 15-20ug 蛋白，加 2 倍 SDS 上样缓冲液 7ul ， DDW 定容至总体积 14ul 。 * 上样总体积一般少于 15ul ，加样孔的最大限度可加 20ul 样品。 2 、 95 ℃孵育

蛋白印迹法蛋白印迹（ Western blot, WB ）是分子生物学、生物化学和免疫遗传学中常用的一种试验方法，是将蛋白质通过 SDS-PAGE 电泳后，再转移到杂交膜上，然后通过抗原抗体复合物对

实验步骤 1.切片经脱蜡入水。 2. 用 1mol/L HCl 浸洗。 3. 切片放入 60 ℃预热的 1mol/L HCl 内 8min 。 4. 室温下 1mol/L HCl 浸洗。 5. 蒸馏水浸洗 2 次，每次 5min. 6. 加入席夫液，于室温反应 30-60

实验背景与原理： DNA 是主要的遗传物质，集中于染色体上。在真核细胞中 DNA 主要存在于细胞核中，在线粒体和叶绿体中也有少量分布。 DNA 的基本组成单位是脱氧核糖核酸，它由脱氧

生物大分子是构成生命的基础物质，主要活性成分的分子量达到上万或更多的有机分子，包括蛋白质、核酸、碳氢化合物等。分子生物学从分子水平研究核酸和蛋白等生物大分子的结构

抽提末再用氯仿处理，处理痕量的酚，然后用水饱和乙醚抽提一次，除去样品中痕量的酚和氯仿，最后 68 ℃水浴孵育 10min 挥发乙醚，便可获得纯净的核酸。获得核酸后，尚需要进行浓