培养原代细胞实验的一些方法
细胞原代培养的目的是为研究生物体细胞的生长、代谢、繁殖提供有力的手段,为传代培养创造条件,服务于临床实践,用于药物筛选等。
实验材料
试剂、试剂盒
仪器、耗材
培养箱 培养瓶 青霉素瓶 小玻璃漏斗 平皿吸管 移液管 纱布 手术器械 血球计数板 离心机 水浴箱
实验步骤
6. 将细胞调整到5×105/ml左右,转移至25 ml细胞培养瓶中,37℃下培养。
3. 凡在超净台外操作的步骤,各器皿需用盖子或橡皮塞,以防止细菌落入。
4. 操作前要洗手,进入超净台后手要用75%酒精或0.2%新洁尔灭擦试。试剂等瓶口也要擦试。
9. 吸溶液的吸管等不能混用。
实验方法原理
将动物机体的各种组织从机体中取出,经各种酶(常用胰蛋白酶)、螯合剂(常用EDTA)或机械方法处理,分散成单细胞,置合适的培养基中培养,使细胞得以生存、生长和繁殖,这一过程称原代培养。因此,较为严格地说是指成功传代之前的培养,此时的细胞保持原有细胞的基本性质,如果是正常细胞,仍然保留二倍体数。但实际上,通常把第一代至第十代以内的培养细胞统称为原代细胞培养。最常用的原代培养有组织块培养和分散细胞培养。
此文引用丁香通