酵母蔗糖酶的制备实验
蔗糖酶 ( inver tase ) ( β -D- 呋喃果糖苷果糖水解酶 ) ( fructofuranoside fructohydrolase ) ( EC. 3 . 2 . 1 . 26 ) 特异地催化非还原糖中的α - 呋喃果糖苷键水解 , 具有相对专一性。不仅能催化蔗糖水解
DEAE纤维素柱层析纯化酶蛋白实验
本实验目的是以柱层析的方法进一步纯化蔗糖酶蛋白,利用 DEAE 纤维素树脂作为离子交换剂进行柱层析分级分离。 实验方法原理 利用 DEAE 纤维素树脂作为离子交换剂进行柱层析分级分
PCR-SSCP原理和操作步骤
原理 PCR-SSCP是1989年日本Orita等创建的筛查突变的新技术。它是一种简单、快速、经济的点突变筛查手段。PCR-SSCP技术的基本原理是PCR扩增后的DNA片段经变性成单链DNA,单链DNA在中性聚丙
存在干扰物质条件下的蛋白质浓度测定实验
习惯上,蛋白质的浓度通常是按 Lowry 及其合作者( Lowry 等, 1951) 的方法用 Folin-Ciocalteau 试剂进行测定的。但样品中的盐或去垢剂等对这种方法有干扰。 Peterson(1977) 介绍了一种改进方法
从组织分离粗制质膜组分的另一实验方法
Neville(1968) 所述的方法对分离鼠肝质膜的效果较好,但对分离其他组织的质膜不一定适用。这里,介绍一种从其他组织制备粗制质膜组分的方法。 从组织分离粗制质膜组分的另一实验方
PCR-SSCP注意的事项
SSCP是一种快速、简便、灵敏的检测基因突变的方法,为了使SSCP达到最佳效果,应注意下列事项。 1. 重复性 影响SSCP重复性的主要因素为电泳的电压和温度。这两个条件保持不变,SSCP图
各级分蔗糖酶活性测定 及纯化率的计算实验
用测定生成还原糖(葡萄糖和果糖)的量来测定蔗糖水解的速度,本实验中,蔗糖酶的活力单位指在一定条件下反应 5 min ,每产生 1 毫克葡萄糖所需酶量。本实验旨在测定各级分的蛋白
PCR-SSCP的发展现状
概述 随着分子生物学技术的发展,检测基因结构和突变的方法不断涌现。尤其是PCR技术问世以后,各种与PCR相结合的基因检测技术进一步推动了基因研究的发展。如不对称PCR产物的直接
存在干扰物质条件下的蛋白质浓度测定实验
习惯上,蛋白质的浓度通常是按 Lowry 及其合作者( Lowry 等, 1951) 的方法用 Folin-Ciocalteau 试剂进行测定的。但样品中的盐或去垢剂等对这种方法有干扰。 Peterson(1977) 介绍了一种改进方法
底物浓度对催化反应速度的影响及米氏常数Km 和最大 反应速度Vmax的测定实验
本实验是以蔗糖为底物 , 利用一定浓度的蔗糖酶水解不同浓度的蔗糖所形成的产物 ( 葡萄糖和果糖 ) 的量来计算蔗糖酶的 Km 值。 二硝基水杨酸法 实验方法原理 根据 Michaelis-Menten 方程