蛋白质测序
一、概念 当前，所谓蛋白质测序，主要指的是蛋白质的一级结构的测定。蛋白质的一级结构 (Primary structure) 包括组成蛋白质的多肽链数目。很多场合多肽和蛋白质可以等同使用。多肽链
甲基化PCR检测方法
一、基因组DNA的提取 此步重点在于DNA的纯度，即减少或避免RNA、蛋白的污染很重要。因此在提取过程中需使用蛋白酶K及RNA酶以去除两者。 使用两者的细节： 1. 蛋白酶K可以使用灭菌双
PPO粗酶液的纯化
一、原理 1. 葡聚糖凝胶 SephadexG-200 凝胶柱层析利用大分子不能进入凝胶颗粒内部最先流出柱外，而小分子物质进入凝胶颗粒内部，流速慢而最后流出柱外，凝胶层析法能将不同分子大小
PCR基本实验方法
Reagent Concentrations: Primers: 0.2 - 1.0 uM Nucleotides: 50 - 200 uM EACH dNTP Dimethyl sulphoxide (DMSO): 0 - 10% (v/v) Taq polymerase: 0.5 - 1.0 Units/50ul rxn Target DNA : 1 ng - 1 ug (NB: higher concn for total genomic DNA ; lower for
聚合酶链反应一单链构象多态性分析 (PCR-SSCP)
聚合酶链反应-单链构象多态性分析（Single Strand Conformation Polymorphism Analysis of Polymerase Chain Reaction Products, PCR -SSCP）是近年来发展起来的一种基因分析方法。 PCR -SSCP分析的基本程序为：首
双向电泳实验
双向电泳（ twodimentionlalgel electrophoresis, 2-DE ) 技术，特别是以固相 pH 梯度等电聚焦为第一向的双向电泳技术是当前分辨率最高，信息量最大的电泳技术。 ISO-DALT 方法 试剂、试剂盒 尿素
琼脂糖凝胶电泳检查PCR产物
1. 用0.5X或1XTBE制备2%（W/V）琼脂糖凝胶，加入适量的溴化乙锭。 2. 琼脂糖凝胶的长度与宽度应该与PCR扩增管数量相适应，每一扩增管应有相应的一个电泳泳道，凝胶厚度为3~5 mm，一般用
慢病毒包装实验
实验材料 病毒 试剂、试剂盒 无血清培养基脂质体胰酶含血清的培养基 DMEM 仪器、耗材 EP 管 6 孔板 CO2 培养箱高速离心机 -80 ° C 冰箱 实验步骤 以六孔板中的 1 孔为例，每个样品需要
克隆PCR产物
克隆PCR扩增DNA片段至质粒或噬粒载体这一过程看似容易，实际操作较难。下面四个方案将叙述扩增DNA片段的克隆难题： 1. PCR产物的平末端克隆。 2. 克隆化的PCR产物连入T载体。 3. 通过
差异性甲基化杂交(DMH)
1. 微阵列构建 （1）基因组片段化：将雄性个体（雄性个体包括完整的染色体，即含有Y染色体）基因组DNA经MseI消化（MseI识别位点为TTAA，可以保证富含CpG的片段不被破坏）成约200 bp 的小
