ChIP染色质免疫沉淀技术六

染色质免疫沉淀中的对照与抗体选择 Input 对照：在进行免疫沉淀前，需要取一部分断裂后的染色质做 Input 对照。 Input 是断裂后的基因组 DNA ，需要与沉淀后的样品 DNA 一起经过逆转交

酶联免疫吸附试验

酶联免疫技术是将抗原抗体反应的特异性与酶促反应的专一性和敏感性结合而形成的一种方法。这是一种固相酶免疫检测技术，始创于 1971 年。它既可用于测定抗原，又可用于测定抗体

染色质免疫沉淀中的对照与抗体选择抗体选择：染色质免疫沉淀所选择的目的蛋白的抗体是ChIP实验成功的关键。因为在蛋白质与染色质交联结合时，抗体的抗原表位可能因为与结合

染色质免疫沉淀中的对照与抗体选择交联反应的逆转和 DNA 的纯化：用不含 DNase 的 RNase 和 Proteinase K ， 65oC 保温 6 小时逆转交联，经 DNA 纯化柱回收 DNA 或用酚氯仿抽提、乙醇沉淀纯化

ChIP 技术的应用染色质免疫沉淀的 DNA 适用于多种分析方法。如果目的蛋白的靶序列是已知的或需要验证的，可采用狭缝杂交 (Slot blot) 的方法，把靶序列特异性探针与染色质免疫沉淀的

ChIP 技术的应用目前，随着人类基因组测序工作的基本完成，研究目的蛋白和整个基因组的相互作用逐渐成为研究的热点。由于基因组中的信息量非常大，上述常规方法通常无法满足科

蛋白提取组织样本总蛋白提取（小鼠肝组织） 1、颈椎脱臼处死小鼠， 75% 乙醇擦拭皮肤，剪开腹腔，剪切肝脏组织。 2、平皿中放入 6ml 预冷 0.9%NaCL 。 3、称取 0.6g 左右肝组织，在平

当免疫组化染色没有出现预期结果时，应系统地查找原因，而每一次只能排除一种可能的原因。对照 / 标本无染色 ① 确认是否忽略了应该加的某种试剂，包括一抗、二抗、三抗及底物

肾脏移植，始创于1950年，开展最早、应用最多和效果最佳的一种器官移植。肾脏移植已成为临床器官移植的重要项目。肾脏移植患者l年和5年的存活率分别可达90%～95%和80%～90%.在HLA基因

一、标本制作可制作涂片、印片、细胞单层培养物、组织切片，经适当固定或不固定，作免疫荧光染色用。二、荧光抗体染色方法（一）直接法 1．染色切片经固定后，滴加经稀释至