SDS-PAGE,蛋白转印,western Blot试剂配制
1.5mol/LTris(PH8.8) 1.称量181.7gTris置于1L烧杯中。 2.加入约800ml去离子水,充分搅拌溶解。 3.用浓盐酸调节pH值至8.8。 4.定容至1L. 5.高压灭菌后,室温保存。 注意:应使溶液冷却至室温
常用HE试剂配制
一、苏木素 (1)Harris苏木素: 配方: 苏木素1g无水乙醇10ml 蒸馏水200ml钾明矾20g HgO0.5g 先将苏木素溶于无水乙醇中,备用。把明矾放入蒸馏水,加热溶解,再加入备用的苏木素,煮沸2分钟
磁性微粒偶联生物分子的原理以及使用
xMagTM磁性微粒表面分别含有氨基、羧基等功能基团,利用戊二醛或1-乙基-3[3-(二甲氨基)丙基]碳二亚胺(EDC)等偶联试剂,将蛋白质、抗体和核酸等生物分子共价结合在其表面,可应用于
筛选多肽的操作步骤
第一天 以0.1MNaHCO3(pH8.6)制备100mg/ml的靶分子溶液。如果需要稳定靶分子,可以用含有金属离子的相似离子强度缓冲液。 在每孔内加入1.5ml靶分子溶液,重复涡旋直至表面完全湿润(这
免疫亲和层析技术
亲和层析技术是纯化各种生物大分子的有效方法。最初是将抗体作为一种结合剂用于免疫亲和层析,根据抗原抗体结合后形成大量多聚体和不溶性基质原理来收集抗原。随后,利用抗体
薄层层析操作要点
铺板 铺板用的匀浆不宜过稠或过稀:过稠,板容易出现拖动或停顿造成的层纹;过稀,水蒸发后,板表面较粗糙。匀浆配比一般是硅胶G:水=1:2~3,硅胶G:羧甲基纤维素钠水溶液=1:2。研
柱层析技术简介
一、简介 根据填充基质和样品分配交换原理不同,离子交换层析,凝胶过滤层析和亲和层析是三种分离蛋白质的经典层析技术。 二、技巧和方法 1.柱层析操作方法的选择 目前,柱色谱
蒽酮法测定可溶性糖
一、原理 糖在浓硫酸作用下,可经脱水反应生成糠醛或羟甲基糠醛,生成的糠醛或羟甲基糠醛可与蒽酮反应生成蓝绿色糠醛衍生物,在一定范围内,颜色的深浅与糖的含量成正比,故可
动物总RNA的提取
实验目的 学习从动物组织中提取RNA的原理和方法。 实验原理 RNA是一类极易降解的分子,要得到完整的RNA必须最大限度地抑制提取过程中内源性及外源性核糖核酸酶对RNA的降解。高浓度
RNA干扰的详细实验步骤
步骤包括: (一)siRNA的设计 1.在设计RNAi实验时,可以先在以下网站进行目标序列的筛选: Genesil Ambion 2.RNAi目标序列的选取原则: (1)从转录本(mRNA)的AUG起始密码开始,寻找AA二连序列,