氢氧化甲基汞琼脂糖凝胶电泳
氢氧化甲基汞和 RNA 中的尿嘧啶和鸟嘌呤上的亚胺键可发生反应，而这些键涉及到 Watson-Crick 碱基配对。因此，氢氧化甲基汞是一种有效的变性剂，能破坏 RNA 的二级结构.在氢氧化甲基汞存在时
总RNA的提取
完整RNA 的提取和纯化，是进行RNA 方面的研究工作，如Nothern杂交、mRNA 分离、RT-PCR、定量PCR、cDNA合成及体外翻译等的前提。所有ＲＮＡ的提取过程中都有五个关键点，即１）：样品细胞或组织
石蜡切片或细胞的原位杂交实验
细胞RNA的原位杂交实验用于在混杂的细胞群体和组织中、定位特异的mRNA在细胞中的存在位置。
双荧光素酶报告基因检测 （miRNA靶基因验证）实验四
1. 质粒转染细胞；2.双报告基因检测；3. 统计学分析
双荧光素酶报告基因检测 （miRNA靶基因验证）实验
由于miRNA主要通过作用于靶基因的3’UTR起作用，可以将目的基因3’UTR区域构建至载体中报告基因luciferase的后面， 通过比较过表达或者干扰miRNA后，报告基因表达的改变（监测荧光素酶的活性变
细胞中mRNA原位杂交技术
原位杂交可分为菌落原位杂交和组织原位杂交。菌落原位杂交是将细菌从培养平板转移到硝酸纤维素滤膜上，然后将滤膜上的菌落裂解以释放DNA。将DNA烘干固定于膜上，然后将滤膜上的菌落裂
荧光素酶及其报告基因的应用和检测
二 荧光素酶 荧光素酶（ Luciferase ）是生物体内催化荧光素 (luciferin) 或脂肪醛 (firefly aldehyde) 氧化发光的一类酶的总称 , 来自于自然界能够发光的生物。 自然界存在的荧光素酶来自萤火
细胞中mRNA原位杂交技术（七）
各种不同类型的探针需要经过恰当的标记，才能在原位杂交中应用。DNA探针一般采用的标记方法为随机引物标记和缺口平移法。
双萤光素酶报告基因检测 （miRNA靶基因验证）实验 （四）
4. 实验步骤 实验共分以下 3 个主要步骤： 1. 质粒转染细胞；2. 双报告基因检测； 3. 统计学分析。 2. 双报告基因检测 (1) 质粒共转染 48 小时后，弃去培养基，用 100 μ l 1XPBS 洗 1 遍 (2)
细胞中mRNA原位杂交技术三
实验步骤： 二．杂交与显色 1 、将加入探针的杂交液先于 50 ℃预热，均匀涂于切片表面，加上硅化盖玻片，放于湿盒中， 50 ℃孵育 12-16h 。 2 、 1 ×SSC （含 50% 甲酰胺）， 50 ℃洗涤
