实验方法
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真核细胞基因组提取

一 . 实验目的及背景 高等动物,高等植物的基因组相当庞大,如人类细胞基因组由 30 亿个碱基对组成,果蝇基因组有 1.4 × 108 个碱基对,水稻基因组有 1.4 × 109 个碱基对。真核细胞基

流式细胞术间接免疫荧光标记的样品制备实验

实验步骤 一、制备前——培养细胞 1. 培养细胞用 0.25% 的胰酶消化。 2. PBS 或生理盐水洗涤细胞 2 次,再用 PBS 或生理盐水悬浮细胞,加入预冷的无水乙醇,终浓度为 60% ~ 70% ,快速混

层析技术(Layer-analise technique)

离子交换层析技术是以离子交换纤维素或以离子交换葡聚糖凝胶为固定相,以蛋白质等样品为移动相,分离和提纯蛋白质、核酸、酶、激素和多糖等的一项技术。 (一)原理 在纤维素

基因克隆:高效感受态细胞制作

方法一 A 液: 1M , MnCl2 : B 液: 1M , HEPES , pH=6.2-6.8 ,用无菌水配,配后不需灭菌; C 液 称取 CaCl2 0.10g , KCl 1.18g ,全部转入细口试剂瓶,然后加入 46ml 三蒸水,轻轻振荡使所有组

细胞增殖检测:3H同位素渗入法实例

一、原理 淋巴细胞在有丝分裂原 PHA 、 ConA 等的刺激下,产生增殖反应, DNA 和 RNA 合成明显增加,如在培养液中加入 3H -胸腺嘧啶核苷( 3H-TdR ),则可被转化中的细胞摄入。测定标记

薄层层析操作要点

铺板 铺板用的匀浆不宜过稠或过稀:过稠,板容易出现拖动或停顿造成的层纹;过稀,水蒸发后,板表面较粗糙。匀浆配比一般是硅胶G:水=1:2~3,硅胶G:羧甲基纤维素钠水溶液=1:2。研

软琼脂克隆形成实验

原理: 细胞接种存活率只表示接种细胞后贴壁的细胞数,但贴壁后的细胞不一定每个都能增殖和形成克隆。而形成克隆的细胞必为贴壁和有增殖活力的细胞。克隆形成率反映细胞群体依

平衡盐溶液配制实验

BSS 的配制实验 实验方法原理 BSS 是从 Ringer 生理盐水发展起来的,主要由无机盐和葡萄糖组成。 BSS 中的无机离子不仅是细胞生命所需成分,而且对维持渗透压、缓冲和调节溶液的酸碱

SNP实验标准操作规程

一、原理 SNP (Single Nucleotide Polymorphism) 即单核苷酸多态性,是由于单个核苷酸改变而导致的核酸序列多态性 (Polymorphism) 。据估计,在人类基因组中,大约每千个碱基中有一个 SNP ,无论

staurosporine诱导小鼠心肌细胞凋亡模型构建

原代心肌细胞的培养及实验方案 取出生后 0~24 h C57BL/6cr 小鼠心脏,按改良的 Lader 方法进行细胞的分离。获取博动的心脏迅速放置于无 Ca2+ 、 Mg2+ 的 Hank ’ s 平衡液中。剪碎心脏,放置

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