微生物学技术
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分子提取方法(三)

总 RNA 的提取 分子生物学研究中要了解目的基因的存在和表达,可通过提取组织或细胞中的总 RNA 检测该基因的信使 RNA 。总 RNA 的构成是比较复杂,包括核内 RNA 和胞质 RNA ,此外 RNas

分子提取方法二

抽提末再用氯仿处理,处理痕量的酚,然后用水饱和乙醚抽提一次,除去样品中痕量的酚和氯仿,最后 68 ℃水浴孵育 10min 挥发乙醚,便可获得纯净的核酸。 获得核酸后,尚需要进行浓

分子提取方法一

生物大分子是构成生命的基础物质,主要活性成分的分子量达到上万或更多的有机分子,包括蛋白质、核酸、碳氢化合物等。分子生物学从分子水平研究核酸和蛋白等生物大分子的结构

微卫星不稳定性的检测五

举例: 大肠癌微卫星不稳定性 2.MI 检测:选用了 D2S119 、 D13S160 、 D8S282 、 D3S1293 、 D2S123 和 D18S58 等 6 个微卫星位点进行检测, PCR 反应体系为 50 mmol/L KCl,10 mmol/L Tris-Cl, 0.1%Trito X-100, 1

微卫星不稳定性的检测三

目前临床上微卫星不稳定性的检测主要利用免疫组化或多聚酶链反应方法,检测项目有 MLH1 、 MSH2 、 MSH6 和 PMS2 。 微卫星不稳定性检测的意义: 1 、 判断预后:目前大量证据表明,错

微卫星不稳定性的检测二

在正常人体细胞内,微卫星的分子结构保持稳定不变,其原因是在人体细胞内有一种能够修复微卫星的安全保障体系,这种安全保障体系是由一系列特异性修复微卫星碱基错配的酶分子

分子提取方法15

蛋白提取 贴壁细胞总蛋白提取 1、 培养于 35mm 培养皿的细胞融合至 80% 左右。 2、 细胞培养皿置于冰上,吸去培养液。 3、 加入 2ml 预冷 PBS 液,洗涤细胞 2-3 次。 * 应在冰上操作,最后

分子提取方法12

DNA 提取 (二) 从各种组织中提取 DNA 2. 从血液中提取 DNA (可以用新鲜血、贮藏血、运送血、也用于羊水中提取 DNA ) (1) 无菌采血 8-20ml ,加入到含有柠檬酸试管中,也可用于 2%E

分子提取方法11

DNA 提取 (二) 从各种组织中提取 DNA 1. 从实体组织中提取 DNA (新鲜组织或冰冻组织) (1) 无菌条件下,组织切片适当小块,液氮中冷冻保存。 (2) 取出组织,置乳钵中迅速磨成粉

分子提取方法10

DNA 提取 (一)培养细胞 DNA 提取 3、 破碎细胞、释放核酸(二) (10) 上清液移至一个新的 1.5ml 离心管中。 (11) 重复( 7 ) ~ ( 10 ) 2~3 次,直至离心后液面间没有蛋白。 (12)

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