蛋白质表达常见问题分析
影响蛋白表达有许多因素,如目的蛋白自身的特点,表达载体、表达菌株的组合,诱导表达的条件,培养基的选择 等,都有可能对蛋白的表达产生影响。针对蛋白表达中的一些常见问题
用FDA染色测定花粉的育性和活力
花粉粒有可育和不育两种,通过一种可以指示膜的完整性的酶对花粉粒进行染色,由于只有可育的花粉在显微镜下可以观察到荧光,而不育的美誉,因此可以将两者区别。 一、材料和试
细胞复苏
细胞复苏 (1)取一塑料杯盛上适量自来水浴锅加热至40℃左右,或直接使用37~38℃的水浴。从液氮中取出冻存管立即投入温水中迅速化冻。 (2)取出冻存管,擦去表面的水,用75℃乙醇
免疫组化难题集锦
1、苏木素复染时间的把握? (1)苏木素复染时间要看当时的室温、溶液的新旧、目标抗原的定位等情况,一般数秒-数分钟。不过这个如果染色不理想可以补救的。即:染色深则分化时
蛋白质检测
体外 SUMO 修饰实验 1、 感受态细胞的制备 (1) 准备 LB 培养基: 0.5% 酵母浸提物、 1% 胰蛋白胨、 1%NaCl(PH 7.0), 高压灭菌, 4 ℃保存备用。 (2) 准备 LB 琼脂平板:取新鲜配置的 100-20
动物组织培养准备技术之清洗与灭菌2
【注意事项】 ( 1 )干热灭菌时,应在白天使用干烤箱,并不断观察,避免发生意外。当温度超过 100℃ 时,不能再打于烤箱门。器皿烤完后,待温度降至 100℃ 之下才能开烤箱门取出
动物生理学实验设计9
神经纤维的双向传导实验 1 ,实验的内容 验证神经纤维的双向传导 2 ,实验的原理 神经细胞膜内外的离子浓度不同,我们称之为膜电位。当神经细胞处于静息状态时,膜电位分布为外
外泌体表征测量技术最新进展
1. 外泌体提取及方法学评价 到目前为止,仍没有一种提取方法能同时保证外泌体的含量、纯度以及生物活性。 1.1 离心法 这是目前外泌体提取最常用的方法。简单来说,收集细胞培养液
免疫组化常见问题的处理
当免疫组化染色没有出现预期结果时,应系统地查找原因,而每一次只能排除一种可能的原因。 对照/标本无染色 ① 确认是否忽略了应该加的某种试剂,包括一抗、二抗、三抗及底物等
蛋白质检测
蛋白印迹( Western blot, WB )是分子生物学、生物化学和免疫遗传学中常用的一种试验方法,是将蛋白质通过 SDS-PAGE 电泳后,再转移到杂交膜上,然后通过抗原抗体复合物对特定蛋白质进