RNA 大量转录合成
RNA 标准转录体系的一般回收率为 lugRNA/ug 质粒 DNA, 使用下面的方法,可以提高回收率至 5〜l0ug RNA/ug 质粒 DNA。大量制备 RNA 可以用于体外翻译。 实验材料 模板 DNA 或质粒 试剂、试剂盒
核转录分析
核转录 (runoff) 分析可以用于检测分离细胞核中特定基因的转录效率。进行核转录失控分析时,在体外将细胞核分离出来,然后在放射性同位素标记的核苷酸存在下进行转录,所合成的
用 T4 DNA连接酶连接RNA分子
实验材料 T4DNA 连接酶 T4 多聚核酸激酶 RNA 供体 受体 寡核苷酸 cDNA 模板 试剂、试剂盒 10X 连接缓冲液 [Y32P]ATP 无 RNase 水 l0 mmol LATP RNasin。 无 RNase 的 DNase。 5XTBE 2X 变性胶上样缓冲液 TE 仪
脱氧核酶切割 RNA 专一位点
脱氧核酶是一类由三十几个脱氧核苷酸构成的寡聚脱氧核糖核苷酸,制备容易,使用方便,是体外在特定位点切割 RNA 的有效方法。常用于体外切割 RNA 底物的脱氧核酶是「10~23」型脱氧
mRNA 在麦胚提取物中的翻译
实验材料 精胺或4.0〜8.Ommol L亚精胺 肌氨酸激酶 新鲜麦胚 沙粒 试剂、试剂盒 提取缓冲液 平衡缓冲液 DEFC 10X能量缓冲液 乙酸钾 DTT LHEPES mRNA [3 H] 或 [35S] 标记的 L-氨基酸 三氯乙酸(TCA
真菌总 RNA 的制备
试剂、试剂盒 酚 氯仿 异戊醇 12mol L 氯化锂 3mol L 乙酸钠 乙醇 DEPC 处理的水 仪器、耗材 水浴 低温高速离心机 实验步骤 一 材料与设备 1) 酚:氯仿:异戊醇 (25:24:1)。 2) 氯仿:异戊醇