免疫荧光技术
2016-05-25来源：未知荧光素标记的抗体与标本中的抗原特异性结合后，形成抗原抗体复合物并带有荧光素；再用荧光显微镜检查上述标本，荧光素受光照射激发就会发出荧光，在显微镜下可以清晰地看见荧光所在的细胞，从而能检测某种抗原的存在与否，并可结合定量技术计算含量。
一、实验原理：直接法是以荧光素标记的抗体直接与标本内的抗原反应，形成抗原—荧光素标记抗体复合物。根据荧光的分布位置及强度，确定相应抗原的存在与否及其所在部位。
二、实验材料：抗体
试剂、试剂盒：PBS 伊文氏兰
仪器、耗材：显微镜
三、实验步骤：
1. 标本经固定后，PBS洗涤3×3 分钟；
2. 加荧光素标记的抗体，湿盒内37 ℃孵育50 分钟；
3. PBS洗涤3×3 分钟；
4. 0.1 %伊文氏兰复染；
5. PBS洗3 次，蒸馏水洗2 次，每次3 分钟，以除去NaCl结晶；
6. 缓冲甘油封片，镜检。
四、注意事项：直接法比较简单，特异性也较高，但每种荧光抗体只能检测一种相应的抗原，应用范围较窄，敏感性也较低。
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