动物细胞转染技术

注意事项： 1.注意细胞的生长状态，最适合转染的细胞是达到指数生长期生长旺盛的细胞。 2.实验前进行预试验确定适当的接种量和培养时间。

如何把细胞养的更漂亮？

有经验和刚刚从事细胞培养工作的人员都应该认真仔细地询问下细胞提供方提供的建议，提前了解所要培养细胞的详细资料，准备好细胞所要用到的培养基和相关试剂，虽然所有的贴壁，半贴壁

细胞冻存是保存细胞的主要方法之一。低温条件可降低细胞的生命活力、代谢速度和对营养的需求。在0℃以下的冰冻条件下，细胞内生命分子的热运动和化学反应受到了极大地限制，细胞处于

（1）细胞凋亡的诱导：HeLa细胞常规传代培养至对数生长期(见细胞传代培养）。实验组细胞加入顺铂溶液（生理盐水配置）至终浓度为20μmo1/L,37℃，5% CO2条件下继续培养。空白实验对照加入等体

（1）取一塑料杯盛上适量自来水浴锅加热至40℃左右，或直接使用37~38℃的水浴。从液氮中取出冻存管立即投入温水中迅速化冻。（2）取出冻存管，擦去表面的水，用75℃乙醇清洁管口，打开

取怀孕14~20d的母鼠，断颈处死，固定在解剖台上，用2%碘酒和75%酒精棉球消毒腹部皮肤。无菌条件下，用大手术剪将皮毛层从胸骨柄下部剪到耻骨联合。换用小直剪剪开腹肌，剖开腹腔，暴露子

早期细胞培养多使用天然培养基，主要是生物体的各种体液，如血浆、血清、淋巴液、组织或胚胎提取液等。其优点是容易得到，营养价值高；缺点是成分不易控制。目前使用的是化学成分明确

（1）原代培养材料的选择，尽量选取繁殖能力较强的组织，如胚胎、幼小的生物体或者肿瘤组织等。

1 培养室实验准备工作大致同细胞传代培养的前6个步骤。简言之：用紫外消毒等消毒超净工作台面；清洗消毒手部；观察细胞；预热培养用液；点燃酒精灯；取出巴斯德吸管、刻度吸管等插在无