小鼠肠系膜微循环实验实验指导
【目的】
1.学习动物微循环显微观察方法。
2.观察药物对小鼠肠系膜微循环障碍的影响。
【原理】借助微循环显微观察系统,直接观察微血管特别是毛细血管的数量和形态,血液特别是血细胞在血管内的流动状态,以及毛血管周围状态,了解用药前后肠系膜微循环的变化。
【器材】 显微镜或显微录像系统、冷光源、小鼠肠系膜观察台、恒温 水浴 、手术器材、注射器等。
【药品】 复方扶芳藤合剂(原液)不含糖醇提物、0.004%去甲肾上腺素(NA)、0.4%戊巴比妥钠溶液
【动物】 小白鼠
【方法】
1.选取禁食12h以上小鼠10只,体重20~22g,雌雄各半。
2.麻醉:0.4%戊巴比妥钠溶液0.2ml/10g体重,ip。
3.手术:腹部切开一小口→轻轻拉出一段回肠→平铺于特制的有机玻璃灌流小池上,内盛有37±1℃任台氏液,以保持活体标本的恒温、恒湿、恒pH和一定的离子浓度。
4.用显微镜放大100倍,选择肠系膜微血管(选用毛细血管与1mm横线相交点)进行观察。
(1) 在视野下局部滴注NA 0.1ml造成微循环障碍。
(2) 在视野下局部滴注受试药物0.1ml(对照组给予同体积
的NS),观察药后血流速度的变化。
血流速度:
①线流:血流快,呈光滑的索状,毫无颗粒感。
②线粒流:血流快,呈光滑的索状,稍有颗粒感。
③粒线流:血较流快,连续成线,有明显颗粒感。
④粒流:血较流快,轴流,缘流混杂,如泥沙流。
⑤粒缓流:血流呈泥沙状,连续缓慢流动。
⑥粒摆流:血流呈泥沙状,前后摆动,仍能流动。
⑦停滞:血流停滞不动。
【结果 】 观察微血管开放时间( min)的变化,结果填入表4。本实验对正常动物微循环血液流速无明显影响。
表 4 复方扶芳藤合剂对小鼠肠系膜微血管开放的影响( )
组 别 动物数(n) 给药后血管开放时间(min)
NS
复方扶芳藤合剂
【注意 】
1、温度对肠系膜微循环影响较大,应保持活体肠系膜标本在37±1℃。
2、腹部切口以1.5~2cm为宜,切口过大肠管易涌出影响观察,切口过小寻找观察部位不便且影响循环。
3、本实验是观察对正常小鼠微循环的影响,可预先复制微循环障碍动物模型(Animal Models),观察活血化瘀方药对微循环障碍的影响。
此文转载:丁香通
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