体外细胞的原代培养、传代培养、冻存和复苏实验方法步骤
一、实验原理 细胞培养 可分为原代培养和传代培养。直接从体内获取的组织细胞进行首次培养为原代培养;当原代培养的细胞增殖达到一定密度后,则需要做再培养, 即将培养的细胞分
原代细胞冻存实验操作步骤
原代细胞冻存技术: 1、选用生长情况好,数量较多的原代细胞,冻存前一天换液一次。 2、贴壁细胞需用0.25%胰酶常规消化将细胞消化下来,将细胞悬液收集至离心管中。 3、1000rpm离心
怎样选择合适的的细胞培养板?
细胞 培 养 的 规 模 可 大可 小, 可 以 使用 生 物 瓶 和 多 孔 板, 多 孔 板 细 胞 培养 更 受 青 睐 , 因 为 实 验 时间 减 少 , 相 对 来 说成 本 降 低 了 。 市场上的细胞培养板可
冷冻蚀刻技术介绍
1、简介 冷冻蚀刻(freeze-etching)技术是在冷冻断裂技术的基础上发展起来的更复杂的复型技术。如果将冷冻断裂的样品的温度稍微升高,让样品中的干冰在真空中升华,而在表面上浮雕出
细胞转染实验简介
一、实验目的 学习和掌握外源基因导入真核细胞的主要方法—脂质体介导的转染 。了解外源基因进入的一般性方法,观测外源蛋白的表达(绿色荧光蛋白),为染色准备实验材料。 二、
选择最适合的细胞增殖检测方法
细胞增殖检测的应用相当广泛,不论是测试药物试剂还是生长因子的效果,不论是评估细胞毒性还是分析细胞活性状态,您都可能会用到它。细胞增殖检测一般是检测分裂中的细胞数量
HEPES缓冲液的配制和使用方法
在细胞培养 过程中,经常少不了HEPES缓冲液。那么,HEPES缓冲液的配制和使用方法怎样呢?HEPES缓冲液是一种弱势,在开放式的培养条件中,若加入HEPES,可防止培养基内pH氧化升高,从而
Nature子刊上的akt pathway的信号通路图
AKT大家一定不陌生,即蛋白激酶B,细胞凋亡重要因子。本文精选了Nature子刊、世界公认的顶尖综述期刊——Nature Reviews Cancer上关于akt pathway的信号通路 图。 Activation of class IA phosphatidy
脂质体介导的稳定转染
外源基因进入细胞主要有三种方法:电击法、磷酸钙法和脂质体介导法,实际上其基本原理都是利用不同的方法在细胞上短时间暂时性的穿孔让外源质粒进入,但是由于前两者的效率低
MTT法检测细胞生长
不可不知的细胞检测方法——MTT 1.取96孔细胞培养 板,每孔中加0.1ml含2×104~10×104靶细胞的培养液(含10%小牛血清的RPMI-1640培养液),在37℃ 5% CO2的饱和水汽二氧化碳培养箱中培养