动物细胞原代培养
2.原代培养操作 (1)取怀孕14~20d的母鼠,断颈处死,固定在解剖台上,用2%碘酒和75%酒精棉球消毒腹部皮肤。无菌条件下,用大手术剪将皮毛层从胸骨柄下部剪到耻骨联合。换用小直剪剪开腹
细胞培养
D-Hanks 液 的 配制 (1)Hanks和D-Hanks液的成分比较。 (2) 依次加入药品至 800mL蒸馏水中,溶解后定容至1000mL。分装成100mL/瓶,其中1瓶加入终浓度0.02%和DETA,准备配制胰蛋白酶。 (3) 高
动物细胞传代培养(一)
贴壁细胞的传代 1 入无菌室之前首先要用肥皂或洗手液洗手,用新洁尔灭溶液擦拭双手消毒。 2 打开超净工作台的紫外消毒灯(紫外消毒 20-30min )。从 CO 2 培养箱取出培养细胞,倒置显
细胞划痕(迁移)实验一
实验步骤: 1 、先用 marker 笔在 6 孔板背后,用直尺比着,均匀得划横线,大约 每隔 1cm 一道,横穿过孔。每孔至少穿过 5 条线。 2 、在空中加入约 5 × 105 个细胞,具体数量因细胞不同
动物组织培养准备技术之清洗与灭菌(1)
(一)使用过的玻璃器皿的清洗 1.使用过的培养用品应立即浸入清水,避免干涸难洗。 2.用洗涤剂清洗玻璃器皿,自来水清洗数遍。倒置自然干燥。 3. 浸入酸性洗液过夜。将玻璃器皿浸
细胞培养注意
a. 实验进行前,先摆好操作台,开启操作台及无菌室紫外灯灭菌 30-60min; b.灭菌后关闭无菌室、操作台紫外,并开启日光灯15-20min 后打开操作台和无菌室加装滤网的通风系统 5-10min以降低
流式细胞仪检测A549细胞凋亡三
流式实验步骤 收集对数生长期 A549 细胞,计数,以 (1 ~ 5) × 105 个 / 孔接种于 6 孔板,置 37 ℃, 5 % CO2 条件下培养过夜,使细胞贴壁;次日更换培养液,各孔分别加入含有不同浓度茶
流式细胞仪检测A549细胞凋亡三
结果判断 凋亡细胞对所有用于细胞活性鉴定的染料如 PI 有抗染性,坏死细胞则不能。 细胞膜有损伤的细胞的 DNA 可被 PI 着染产生红色荧光,而细胞膜保持完好的细胞则不会有红色荧光
流式细胞仪检测A549细胞凋亡二
实验原理 在正常细胞中,磷脂酰丝氨酸( PS )只分布在细胞膜脂质双层的内侧,而在细胞凋亡早期,细胞膜中的磷脂酰丝氨酸( PS )由脂膜内侧翻向外侧。 AnnexinV 是一种分子量为 3
流式细胞术检测细胞周期
1 实验原理 用流式细胞仪检测细胞周期,通常用碘化丙啶( propidium iodide , PI )染细胞核。 PI 在一定波长的光下发出荧光,其强度与 DNA 含量成正比。通过流式细胞仪分析各时期的细胞