线粒体的分级分离实验
2016-05-25来源:未知
分级分离(Fractionation)由低速到高速离心逐渐沉降。先用低速使较大的颗粒沉淀,再用较高的转速,将浮在上清液中的颗粒沉淀下来,从而使各种细胞结构,如细胞核、线粒体等得以分离。
高速离心法
实验材料 线粒体
仪器、耗材 离心机
实验步骤
1. 将装有上清液的高速离心管,从装有冰块的烧杯中取出,配平后,以17 000 rpm 离心20分钟,弃上清,留取沉淀物。
2. 加入0.25 mol/L 蔗糖-0.003 mol/L 氯化钙液1 ml,用吸管吹打成悬液,以17 000 rpm 离心20分钟。
3. 将上清吸入另一试管中,留取沉淀物,加入0.1 ml 0.25 mol/L 蔗糖-0.003 mol/L 氯化钙溶液混匀成悬液(可用牙签)。
4. 取上清液和沉淀物悬液,分别滴一滴于干净载玻片上(分别标记①、②涂片),各滴一滴0.02%詹纳斯绿B染液盖上盖片染20分钟。
来源:生物帮