全新实时细胞活力检测试剂盒

      RealTime-Glo™ MT Cell Viability Assay 是一种新型的非裂解性、均质生物发光法细胞活力检测系统，可检测细胞还原电位继而反应出细胞的代谢情况，而实时检测培养基中的活细胞数量。检测系统采用性能出众的 NanoLuc® luciferase 和可渗透细胞的 NanoLuc® 底物前体。活细胞可将特异性底物前体还原而产生 NanoLuc® luciferase 底物。这种底物可从细胞中扩散到外周的细胞培养基中，从而与 NanoLuc® Luciferase 快速反应而产生发光信号。信号强度与活细胞数量相关，因此可以用于细胞毒性研究。试剂最长可在 72 小时内保持性能稳定，对活细胞没有毒性。无需洗涤细胞，去除培养基，或加入其它试剂即可完成活细胞数量检测。试剂本身的非裂解的特性使其可在同一细胞培养孔中持续监测细胞，从而减少细胞用量和细胞培养的成本，细胞也可用于下游应用，包括多重检测和核酸分析。

       图1.检测原理图示。

       优势

      •  实时细胞活力检测 : 实时监测细胞活力来确定细胞毒性的发作，参照一个简单的，基于多孔板操作的实验说明书可随着时间的推移分析药物的   效力和有效性，进行细胞生长的变化。
      •  卓越的灵敏度 :  生物发光检测系统，与基于还原电位检测比色和荧光细胞活力检测法相比，在更短的时间里检测出数据的信噪比更高，灵敏度更佳。
      •  实验操作更灵活 : 可在铺细胞时同时加入试剂进行检测，或者与化合物一起加入，或者在任何需要检测细胞活力的时间点加入进行检测。另外，也可进行终点法细胞活力检测。
      •  非裂解性检测模式 : 无需裂解即可检测。可与其他发光或荧光检测系统进行细胞的叠加检测而无需特殊滤片，细胞也可用于多种下游应用。只需少量细胞样本，即可获得更多的数据。
      •  公认的细胞活力检测标志物 :  检测原理是基于细胞还原电位的检测，这是公认的可信的细胞活力的代谢标志物。
      •  可用于自动化高通量筛选：检测系统兼容自动化高通量操作。可在 96-, 384- 和 1,536 孔板这种低体积模式下检测。

      应用   

      •  确定细胞活力。
      •  确定细胞毒性的发生。
      •  分析药物效力和有效性。
      •  分析细胞生长的差异。
      •  确定上游分子应用的可行性。

      图2.使用RealTime-Glo™ MT细胞活力检测试剂盒实时监测细胞活力，测定EC50。在384孔板中每孔加入40ul含有2X RealTime-Glo™ Reagent的培养基的A549细胞，细胞密度500个细胞/孔，再加入等体积2X bortezomib。72h监测发光信号。图A:每小时检测一次细胞活力(Tecan Infinite® P200 multimode reader with gas control module 937C/5% CO2)。EC50 数值以GraphPad Prism®软件计算。图B. 如图所示，每个浓度与阴性对照组相比，细胞活力数据有3倍的变化。

此文转载来源：生物通