高氏I号培养基的制备实验
2016-05-25来源:未知
高氏I号培养基是用来培养和观察放线菌形态特征的合成培养基。如果加人适量的抗菌药 物(如各种抗生素、酚等),则可用来分离各种放线菌。
高氏I号培养基制备
实验方法原理 高氏I号培养基是用来培养和观察放线菌形态特征的合成培养基。如果加人适量的抗菌药 物(如各种抗生素、酚等),则可用来分离各种放线菌。此合成培养基的主要特点是含有多种化学成分已知的无机盐,这些无机盐可能相互作用而产生沉淀,如高氏I号培养基中的磷酸盐和镁盐相互混合时易产生沉淀,因此,在混合培养基成分时,一般是按配方的顺序依次溶解各成分,甚至有时还需要将二种或多种成分分别灭菌,使用时再按比例混合。此外,合成培养基有的还要补加微量元素,如高氏I号培养基中的FeS04 ·7H2O的量只有0.001%,因此在配制培养基时需预先配成髙浓度的FeS04 ·7H2O贮备液,然后再按需加人一定的量到培养基中。
试剂、试剂盒 可溶性淀粉KNO3NaCl琼脂K2HP04·3H2OMgS04·7H2OFeS04·7H2ONaOHHCl
仪器、耗材 试管三角烧瓶烧杯量筒玻棒培养基分装器天平牛角匙高压蒸气灭菌锅pH试纸棉花牛皮纸记号笔麻绳或橡皮筋纱布
实验步骤
一、高氏I号培养基配方
二、器材
1. 溶液或试剂
可溶性淀粉,KNO3,NaCl,琼脂,K2HPO4 ·3H2O,MgS04·7H2O,FeS04·7H2O,1 mol/L NaOH,1 mol/L HCl。
2. 仪器或其他用具
试管,三角烧瓶,烧杯,量筒,玻棒,培养基分装器,天平,牛角匙,高压蒸气灭菌锅,pH试纸(pH 5.0-9.0),棉花,牛皮纸,记号笔,麻绳或橡皮筋,纱布等。
三、操作步骤
1. 称量和溶化
(1)按配方先称取可溶性溶粉放人小烧杯中,并用少量冷水将淀粉调成糊状,再加人少于所需水量的沸水中,继续加热,使可溶性淀粉完全溶化。
(2)然后再称取其他各成分依次逐一溶化。
(3)对微量成分FeS04 ·7H2O可先配成高浓度的贮备液按比例换算后再加人,方法是先在100 ml水中 加人1 g的FeS04 ·7H2O配成0.01 g/ml,再在1000 ml培养基中加1 ml的0.01 g/ml的贮备液即可。
(4)待所有药品完全溶解后,补充水分到所需的总体积。如要配制固体培养基,其溶化过程同牛肉膏蛋白胨培养基制备实验
2. pH调节、分装、包扎、灭菌及无菌检査
同牛肉膏蛋白胨培养基制备实验。
推荐:培养细胞的染色实验
此文转载来源:丁香通