心肌细胞的原代培养

前期准备

1、无菌工作台灭菌。

2、处死小鼠，对小鼠进行酒精消毒，取出心脏。

实验操作：

1、将取出的心脏放入小烧杯中，加入一定量的PBS，将小鼠心脏剪碎，速度要快。剪碎完后将原来的PBS去掉，加入新的PBS洗去血块。

2、细胞分离：（两种）

组织块法：对除去血块的组织块，加入新鲜培养液，轻轻吹打使细胞悬浮，将细胞悬液放入细胞过滤网中过滤，将大的细胞细胞团块除去后，用吸管将细胞悬液吸入12孔培养板的六个孔中，再加入一定量的新鲜培养液后，放入二氧化碳培养箱（温度：37℃,CO2浓度：5%）中进行培养。
    消化法：第一步和前面的一样。在组织块中加入2mL胰蛋白酶（含EDTA)后在37℃恒温水浴锅中进行消化15分钟，取出，吸走消化液，加入新鲜培养液1分钟，进行终止消化，吸走培养液后加入一定量的新的培养液，轻轻吹打，使细胞悬浮，用干净的吸管分装到培养板中分装六个孔，放入二氧化碳培养箱（温度：37℃,CO2浓度：5%）中进行培养。

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