荧光素酶及其报告基因的应用和检测
2016-05-25来源:未知
四 荧光素酶报告基因的检测方法
依赖生物发光特性,利用闪烁计数器( scintillationcounter) 对荧光素酶的活性作出定量检测。在标准反应条件下,加入超量底物,经一定时间内,荧光闪烁总数与样品中存在荧光素酶的活性成正比。另外,也可以采用光自显影法对荧光素酶进行定性检测。
五 利用MicroChemi检测植物叶片中的荧光素酶生物发光
1 打开MicroChemi相机开始制冷
2将植物叶片喷加发光底物(喷底物的过程需遮光)
3 将样品置入MicroChemi暗室室温孵育10min(孵育时间随样品而定)
4 打开MicroChemi软件,设置拍摄参数
5利用binning3x3,每10分钟曝光一次,共曝光三张
6添加伪彩,调节照片的对比度,得到最佳照片
附:利用MicroChemi2.0检测烟草叶片中荧光素酶的发光,曝光10min,binning3x3