C-Myc免疫共沉淀试剂
2016-05-25来源：未知
免疫共沉淀是一种研究蛋白质相互作用的常用方法，其应用抗体免疫沉淀抗原，以共沉淀相互作用的蛋白。传统的免疫共沉淀方法用琼脂糖蛋白A或G共洗脱抗体轻、重链，这会掩盖重要结果。美国Signosis公司C-Myc标签免疫共沉淀试剂盒提供了一种简单快速的方法，用连接有抗C-Myc标签抗体的磁珠研究带C-Myc标签的蛋白，抗体和磁珠的共价连接形成的沉淀产物进行WB检测时背景较低，高亲和性和特异性抗体包埋的磁珠高效特异的免疫沉淀或共沉淀相互作用物。
A. 优点：
快速——高亲和性的抗·C-Myc抗体交联的磁珠免疫沉淀带·C-Myc标签的蛋白或免疫共沉淀相互作用物，无需前分离步骤，缩短孵育时间
噪音低——抗体与磁珠的共价连接，形成的沉淀终产物无抗体污染
A. 优点：
快速——高亲和性的抗·C-Myc抗体交联的磁珠免疫沉淀带·C-Myc标签的蛋白或免疫共沉淀相互作用物，无需前分离步骤，缩短孵育时间
噪音低——抗体与磁珠的共价连接，形成的沉淀终产物无抗体污染
结果一致性高——磁珠易于通过磁架分离，少而快的洗涤无样品丢失
简便——试剂盒包含全部试剂组份
B. 原理：Myc标签的表达载体用于转染靶细胞。转染后，特异蛋白表达Myc抗原决定部位标签，与反应蛋白结合。复合物与相应蛋白可以快速高效的与抗Myc抗体免疫共沉淀，共沉淀复合物通过磁力架进一步与未结合的蛋白分开，洗涤后，复合物高效彻底的从磁珠上洗脱下来，用SDS-PAGE分离以进一步WB分析。磁珠上固相的Myc抗体在低PH洗脱条件下通过阻止轻链和重链的解离提供更好的WB检测。
此文转载：丁香通
